Hepatitis C: geographical diversity and temporal trends of seropositivity in brazilian blood donors from Minas Gerais state, Brazil

Introduction: Hepatitis C virus (HCV) is transmissible through blood products and is a public health problem in Brazil. Monitoring blood donors may help to understand its trends in the general population. The evolution of HCV antibody prevalence in blood donors from Minas Gerais, south-eastern Brazil, and its distribution in first-time donors are shown. Methodology: From 1993 to 2007, 3,249,944 blood donors were screened for HCV-Ab with ELISAs. Results: Of the donors tested, 8,107 were reactive for HCV-Ab (0.25 por cento CI=0.2441-0.2549). The total prevalence decreased from a maximum of 0.91 por cento in 1993 to 0.098 por cento in 2007. Among 1,283,970 first-time donors in the 2003 to 2007 period, there were 1,792 (0.51 por cento) reactive for HCV-Ab. The cities of Sete Lagoas and Passos had the highest prevalence (0.76 por cento), followed by Uberaba (0.62 por cento) and Belo Horizonte (0.60 por cento). Betim, Diamantina and Ituiutaba had the lowest rates (< 0.4 por cento). Discussion: The decrease in the prevalence of HCV-Ab in blood donors may be due to improved tests, better donor selection and deferral of the repeat donors. The asymmetrical distribution may reflect different profiles of exposure to HCV and may help elicit public health measures that, in turn, will help foster a safer donor population...

Introdução: O vírus da hepatite C (HCV) é transmissível por meio de produtos sanguíneos e consiste em um problema de saúde pública no Brasil. O monitoramento de doadores pode contribuir 2013para o entendimento da tendência desta infecção na população geral. Neste estudo, mostramos a evolução da prevalência de HCV em doadores de Minas Gerais, no sudoeste do Brasil e sua distribuição em doadores de primeira vez, que apresentam maior semelhança com a população. Metodologia: De 1993 a 2007, 3.249.944 doadores de sangue foram triados para HCV usando a metodologia de ELISA. Resultados: Dos doadores testados, 8.107 foram reativos para HCV (0,25 por cento CI=0,2441-0,2549). A prevalência total caiu de um máximo de 0,91 por cento in 1993 para 0,098 por cento em 2007. Dentre os 1.283.970 doadores de primeira vez no período de 2003 a 2007 havia 1.792 (0,51 por cento) indivíduos reativos para HCV. As cidades de Sete Lagoas e Passos tiveram a prevalência mais elevada (0,76 por cento), seguidos por Uberaba (0,62 por cento) e Belo Horizonte (0,60 por cento). Betim, Diamantina e Ituiutaba apresentaram as taxas mais baixas (< 0,4 por cento). Discussão: Redução da prevalência de HCV em doadores é significativa para a segurança do estoque de sangue e pode ser devida à melhoria dos testes, à melhor seleção de doadores e a retirada do grupo de doadores daqueles de repetição que ainda não haviam sido testados. A distribuição assimétrica no estado pode refletir os diferentes perfis de exposição ao HCV e podem auxiliar na elaboração de medidas de saúde pública que poderão, por sua vez, contribuir para uma população de doadores mais saudável...

Thrombospondin-1 expression in human T-lymphotropic virus 1 asymptomatic carriers and patients with HTLV-associated myelopathy/tropical spastic paraparesis / Expressão de Trombospondina-1 em indivíduos infectados pelo HTLV-1 assintomáticos e pacientes portadores da mielopatia associada ao HTLV/Paraparesia Espástica Tropical

O Vírus Linfotrópico de células T humanas tipo 1 (HTLV-1) está associado a uma mielopatia (chamada mielopatia associada ao HTLV - HAM/TSP). A trombospondina-1 (TSP-1) é uma proteína da matriz que interfere com a adesão, a motilidade, e a proliferação celular. Níveis deexpressão de RNA mensageiro (mRNA) da trombospondina-1 foram avaliados em indivíduos infectados por HTLV-1: 11 pacientes assintomáticos, 18 com mielopatia ou oligossintomáticos, e 13participantes não-infectados. O RNA de células mononucleares do sangue periférico foi submetido à análise de RT-PCR para trombospondina-1. O número de indivíduos que expressaram esta proteína foi maior no grupo com mielopatia/sintomas (14/18, p igual 0,007). Em geral, a tendência para valores mais elevados de mRNA de trombospondina-1 foi observada no grupo de infectados pelo vírus (p igual 0,062). Os níveis mais elevados de expressão do mRNA foram detectados no início dos sintomas clínicos da HAM/TSP. Estudos adicionais com maior número de amostras são necessários para elucidar melhor o papel desta proteína da matriz na rede inflamatória relacionada à HAM/TSP.

High prevalence of HTLV-1 and 2 viruses in pregnant women in São Luis, state of Maranhão, Brazil / Alta prevalência dos vírus HTLV-1 e 2 em gestantes de São Luis, estado do Maranhão, Brasil

INTRODUCTION: Human T cell lymphotropic virus type 1 (HTLV-1) is endemic in the Caribbean, Japan, South America and regions of Africa. HTLV-2 is present in Native American populations and associated with IV drug use in Europe and North America. In Brazil, it is estimated that 1.5 million people are infected with HTLV-1/2. The study objective was to determine HTLV-1/2 prevalence in pregnant women in the prenatal care from three public services in São Luis, State of Maranhão, Brazil, and to counsel seropositive women to reduce viral transmission. METHODS: A cross-sectional study was conducted from February to December 2008; women with age of 18 to 45 years, with low risk for sexually transmitted disease (STD) were invited to participate. Blood samples were collected in filter paper, and HTLV-1/2 immunoenzymatic test (ELISA) was performed as a screening test. Women with reactive results were submitted to peripheral venous blood collection for ELISA repetition, followed by Western blot (WB) and real-time PCR to confirm and discriminate the infection between virus types 1 and 2. RESULTS: Of the 2,044 women tested, seven (0.3%) were ELISA reactive and confirmed positive (four were HTLV-1, and three were HTLV-2). All positive women were oriented not to breastfeed their newborns. CONCLUSIONS: This study showed that the virus is present in high prevalence in that population. Further studies covering other segments of the population are necessary to better characterize the presence of HTLV-1/2 in Maranhão and to elicit measures to prevent its spread.

INTRODUÇÃO: O vírus linfotrópico de células T humanas tipo 1 (HTLV-1) é endêmico no Caribe, Japão, América do sul e regiões da África. O HTLV-2 está presente em populações indígenas das Américas e usuários de drogas injetáveis na Europa e América do Norte. No Brasil, estimase que 1,5 milhões de pessoas estejam infectadas pelo HTLV-1/2. O objetivo deste estudo foi de determinar a prevalência do HTLV-1/2 em gestantes atendidas no pré-natal de três serviços públicos em São Luis, Maranhão, e orientar as mulheres soropositivas para reduzir a transmissão viral. MÉTODOS: Foi realizado um estudo transversal, de fevereiro a dezembro de 2008, com gestantes de 18 a 45 anos, com baixo risco de doença sexualmente transmissível (DST). Amostras de sangue foram coletadas em papel filtro e submetidas à técnica de ensaio imunoenzimático (ELISA) como teste de triagem para HTLV-1/2. As gestantes com resultado ELISA reativo foram submetidas à coleta de sangue venoso periférico para repetição do ELISA, seguido por WB e PCR em tempo real para confirmar e discriminar a infecção pelos tipos virais. RESULTADOS: Das 2.044 mulheres examinadas, sete (0.3%)tiveram resultados reativos e foram confirmadas soropositivas (quatro para HTLV-1 e três para HTLV-2). Todas as sete gestantes foram orientadas a não dar leite materno aos filhos. CONCLUSÕES: Este estudo mostrou que o HTLV-1/2 está presente em alta prevalência na população das mulheres grávidas estudadas. São necessários outros estudos contemplando diferentes segmentos populacionais para caracterizar a presença do HTLV-1/2 no Maranhão, e permitirmedidas preventivas contra a disseminação viral.

Decline in prevalence and asymmetric distribution of human T cell lymphotropic virus 1 and 2 in blood donors, State of Minas Gerais, Brazil, 1993 to 2007 / Declínio na prevalência e distribuição assimétrica do vírus linfotrópico de células T humanas em doadores de sangue, Estado de Minas Gerais, Brasil, 1993 a 2007

INTRODUCTION: Human T cell lymphotropic virus types 1 and 2 (HTLV-1/2) are endemic in Brazil and are screened for in transfusion services since 1993. This study evaluated the evolution of the prevalence of HTLV-1 and 2 in blood donors of the Hemominas Foundation from 1993 to 2007, and its geographical distribution in State of Minas Gerais, Brazil. METHODS: The Hemominas Foundation is a centralized blood center in Minas Gerais, Brazil. The sources of data were the Hemominas Foundation Technical Bulletin and files from the centralized serological laboratory. Donors were tested in the period using enzyme linked immuno sorbent assays (ELISA), followed by Western blot, when repeatedly reactive. The data were analyzed by EPIINFO 6.2 and TABWIN 3.5 softwares. RESULTS: The average seroprevalence in the period 1993-2007 was 0.1 percent. A steady decline occurred from 0.4 percent in 1993 to below 0.1 percent in 2002 and later, with a transient peak of 0.5 percent in 1994. HTLV reactivity distribution was asymmetrical in the state, with regions of higher prevalence, interspersed with low prevalence areas. Comparison of positive and negative donors verified that increasing age was proportional to virus positivity. Odds ratio for age ranged from 1.43 (30 to 39 years-old) to 3.09 (50 to 65 years-old). Women had a greater chance of being positive (OR-1.64), as previously described. CONCLUSIONS: Possible explanations for HTLV-1/2 prevalence decline are the exclusion of positive donors from the donor pool, an increase in repeat donors and ELISA test improvement, with reduction in the number of false positive results.

INTRODUÇÃO: Os vírus linfotrópicos de células T humanas 1 e 2 (HTLV-1/2) são endêmicos no Brasil e são testados nos serviços de transfusão desde 1993. Este estudo avaliou a evolução da prevalência do HTLV-1 e 2 em doadores de sangue da Hemominas, de 1993 a 2007, bem como sua distribuição geográfica no Estado de Minas Gerais, Brasil. MÉTODOS: A Hemominas é um serviço transfusional centralizado em Minas Gerais, Brasil. As fontes de dados foram o Boletim Técnico da Fundação Hemominas, e os dados informatizados do laboratório central de sorologia. Os doadores foram testados no período utilizando ensaio enzimático (ELISA), seguido de Western blot, para confirmação, se repetidamente reagentes. Os dados foram analisados utilizando EPIINFO 6.2 e TABWIN 3.5. RESULTADOS: A prevalência media no período 1993-2007 foi de 0,1 por cento. Houve declínio contínuo de 0,4 por cento em 1993 para menos de 0,1 por cento de 2002 em diante, com um pico transitório de 0,5 por cento em 1994. A distribuição do HTLV foi assimétrica, com alternância de regiões de alta e baixa prevalências. A comparação entre doadores positivos e negativos mostrou que a idade aumenta a positividade para o vírus. A OR para idade variou de 1,43 (30 a 39 anos) a 3,09 (50 a 65 anos). As mulheres tiveram chance maior de ser positivas (OR-1,64), como descrito anteriormente. CONCLUSÕES: As possíveis explicações para o declínio do HTLV-1/2 foram a exclusão de doadores positivos, aumento nos doadores de repetição, e melhora nos testes de ELISA, com redução do número de testes falso positivos.

HTLV-1 associated myelopathy diagnosed during lepromatous leprosy reaction treatment: a case report / Mielopatia associada ao HTLV-1 diagnosticada durante tratamento de hanseníase virchowiana reacional: relato de caso

Leprosy and human T cell lymphotropic virus type 1 infection are prevalent in Brazil. Coinfection by Mycobacterium leprae and HTLV-1 is reviewed and a case is reported. A 59 year-old woman was followed and HTLV-1 associated myelopathy was diagnosed during leprosy treatment. The clinical and neurological aspects of this unusual association were initially reviewed. Immunological markers and the possible prognoses due to the association of the diseases were discussed. The unexpected association of leprosy and HTLV-1 associated myelopathy may occur in endemic areas and causes difficulties in determining the correct diagnosis and adequate management of the neurological manifestations.

Hanseníase e infecção pelo HTLV-1 são prevalentes no Brasil. A associação de hanseníase e infecção por HTLV-1 é revista e é relatado um caso de coinfecção. Paciente feminina de 59 anos teve diagnóstico de mielopatia associada ao HTLV-1 durante o tratamento para hanseníase. Aspectos clínicos e neurológicos desta associação, ainda não descrita, são revistos e os marcadores imunológicos e possíveis evoluções relacionadas com a associação dessas doenças discutidos. A associação de hanseníase e mielopatia associada ao HTLV-1, aparentemente pouco usual, pode ocorrer em áreas endêmicas e trazer dificuldades para o diagnóstico e tratamento das manifestações neurológicas.

Geographic distribution of human T-lymphotropic virus types 1 and 2 among mothers of newborns tested during neonatal screening, Minas Gerais, Brazil / Distribución geográfica del virus linfotrópico de células T humanas tipos 1 y 2 en madres de recién nacidos estudiados en el tamizaje neonatal en Minas Gerais, Brasil

OBJECTIVE: To evaluate the geographic distribution of human T-lymphotropic virus types 1 and 2 (HTLV-1/2) in the State of Minas Gerais, Brazil, in puerperal women whose newborns were tested for HTLV-1/2 during neonatal screening, and to overlap seropositivity with social and economic status determinants. METHODS: During September-November 2007, the dry-blood samples taken from newborns on filter paper for routine screening were also tested for maternal IgG anti-HTLV-1/2 antibodies. For reactive samples, the mothers of the newborns had blood drawn to test for these viruses. RESULTS: The study analyzed 55 293 specimens taken from newborns. Of these, 52 (9.4 per 10 000) were reactive and 42 mothers (7.6 per 10 000) were confirmed with HTLV-1/2 infection. HTLV-1/2 geographic distribution was heterogeneous, with a tendency to be higher in the North and North-East parts of Minas Gerais. The highest rates of seropositivity were observed in Vale do Mucuri (55.9 per 10 000) and in Jequitinhonha (16.0 per 10 000), overlapping with the State's worst social and economic indicators. CONCLUSIONS: To our knowledge this was the first time that neonatal screening for HTLV-1/2 was performed in Brazil. This model could be used in other areas with high HTLV-1/2 prevalence rates. The detection of carrier mothers can enable intervention measures, such as providing infant formula to newborns, to be implemented expeditiously to reduce vertical transmission.

OBJETIVOS: Evaluar la distribución geográfica del virus linfotrópico de células T humanas tipos 1 y 2 (HTLV-1/2) en el estado de Minas Gerais (Brasil), en mujeres puérperas en cuyos recién nacidos se analizó la presencia del HTLV-1/2 durante las pruebas neonatales de detección sistemática, y superponer la seropositividad con determinantes del estado socioeconómico. MÉTODOS: Entre septiembre y noviembre de 2007, en las muestras de sangre seca extraída a los recién nacidos en papel de filtro para un tamizaje sistemático, se analizaron también los anticuerpos maternos de tipo IgG anti-HTLV-1/2. En el caso de las muestras reactivas, se extrajo la sangre de las madres de los recién nacidos para realizar pruebas de detección de estos virus. RESULTADOS: En el estudio se analizaron 55 293 muestras extraídas de los recién nacidos. De estas, 52 (9,4 por 10 000) fueron reactivas y en 42 madres (7,6 por 10 000) se confirmó la infección por el HTLV-1/2. La distribución geográfica del HTLV-1/2 fue heterogénea, con una tendencia a ser mayor en el norte y el noreste de Minas Gerais. Las tasas más elevadas de seropositividad se observaron en Vale do Mucuri (55,9 por 10 000) y en Jequitinhonha (16,0 por 10 000), superponiéndose con los peores indicadores socioeconómicos del estado. CONCLUSIONES: Esta fue la primera vez que se realizó un tamizaje neonatal para el HTLV-1/2 en Brasil. Este modelo podría usarse en otras regiones con tasas de prevalencia altas del HTLV-1/2. La detección de las madres portadoras puede permitir la aplicación rápida de medidas de intervención, como por ejemplo, el suministro de leche maternizada a los recién nacidos, a fin de reducir la transmisión vertical.

Evaluation of the use of real-time PCR for human T cell lymphotropic virus 1 and 2 as a confirmatory test in screening for blood donors / Análise do uso da PCR em tempo real para HTLV-1 e 2 como teste confirmatório na triagem de doadores de sangue

INTRODUCTION: HTLV-1/2 screening among blood donors commonly utilizes an enzyme-linked immunosorbent assay (EIA), followed by a confirmatory method such as Western blot (WB) if the EIA is positive. However, this algorithm yields a high rate of inconclusive results, and is expensive. METHODS: Two qualitative real-time PCR assays were developed to detect HTLV-1 and 2, and a total of 318 samples were tested (152 blood donors, 108 asymptomatic carriers, 26 HAM/TSP patients and 30 seronegative individuals). RESULTS: The sensitivity and specificity of PCR in comparison with WB results were 99.4 percent and 98.5 percent, respectively. PCR tests were more efficient for identifying the virus type, detecting HTLV-2 infection and defining inconclusive cases. CONCLUSIONS: Because real-time PCR is sensitive and practical and costs much less than WB, this technique can be used as a confirmatory test for HTLV in blood banks, as a replacement for WB.

INTRODUÇÃO: A triagem para HTLV-1/2 em doadores de sangue geralmente utiliza imunoensaio enzimático, seguido de um método confirmatório como Western blot quando o EIA é positivo, mas este algoritmo mostra alta taxa de resultados inconclusivos, e elevado custo. MÉTODOS: Dois ensaios qualitativos de PCR em tempo real foram desenvolvidos para detectar HTLV-1 e 2 e um total de 318 amostras foram testadas por PCR (152 de doadores de sangue, 108 de portadores assintomáticos, 26 de pacientes HAM/TSP e 30 de indivíduos soronegativos). RESULTADOS: A sensibilidade e especificidade das PCR em relação aos resultados de WB foram de 99,4 por cento e 98,5 por cento, respectivamente. As PCR foram mais eficientes em identificar o tipo viral, a infecção pelo HTLV-2 e úteis para definir casos inconclusivos. CONCLUSÕES: Por serem sensíveis, práticas e de custo muito inferior ao do WB, as técnicas de PCR em tempo real podem ser usadas como teste confirmatório do HTLV em bancos de sangue, em substituição ao WB.

Avaliação do desempenho de parâmetros imunológicos como indicadores de progressão clínica da infecção crônica pelo HTLV-1 / Evaluation of the performance of immunological parameters as indicators for clinical progression of chronic HTLV-1 infection

Neste estudo, foi avaliado o desempenho isolado e combinado de parâmetros laboratoriais, percentual de linfócitos B ( por centoLB), a razão entre células T/B e o por centoCD8+HLA-DR+/CD8+, na identificação de indivíduos assintomáticos-AS ou portadores de HAM/TSP-HT numa população de casos soropositivos para HTLV-1. índices expressos em porcentagem demonstram que cada parâmetro, isoladamente, apresenta desempenho moderado, com co-negatividade=83 por cento e 91 por cento para por centoLB e razão entre células T/B, respectivamente e co-positividade=78 por cento para por centoCD8+HLA-DR+/CD8+. A análise combinada ( por centoCD8+HLA-DR+/CD8+ e razão T/B) não revelou ganho significativo no desempenho (co-positividade=75 por cento, co-negatividade=74 por cento). A análise das razões de verossimilhança em diferentes faixas de valores, para os parâmetros isolados, revelou que um indivíduo soropositivo para HTLV-1 com por centoLB<7 por cento, razão entre células T/B>11 e por centoCD8+HLA-DR+/CD8+>70 por cento possui, respectivamente, 11, 19 e quase 10 vezes mais chances de pertencer ao grupo HT. Portanto, recomenda-se o uso desses indicadores fenótipos na propedêutica laboratorial complementar de monitoração da progressão clínica da infecção crônica pelo HTLV-1.

This study evaluated the performance of single and combined laboratory parameters, B-lymphocyte percentages ( percentLB), T/B cell ratio and percentCD8+HLA-DR+/CD8+, to differentiate asymptomatic cases (AS) from HAM/TSP patients (HT) within a population of HTLV-1 seropositive cases. Percentage indices demonstrated that each parameter alone presented moderate performance, with co-negativity of 83 and 91 percent for percentLB and T/B cell ratio, respectively, and co-positivity of 78 percent for percentCD8+HLA-DR+/CD8+. Combined analysis ( percentCD8+HLA-DR+/CD8+ and T/B cell ratio) did not show any substantial performance enhancement (co-positivity = 75 percent and co-negativity = 74 percent). Likelihood ratio analysis using different value ranges for the separate parameters revealed that HTLV-1 seropositive cases with percentLB<7 percent, T/B cell ratio>11 and percentCD8+HLA-DR+/CD8+>70 percent would have, respectively, 11, 19 and 10 times greater chance of belonging to the HT group. Therefore, use of these phenotypic indicators as complementary laboratory methods for monitoring the clinical progression of chronic HTLV-1 infection is recommended.

Production of specific polyclonal antibodies anti-human factor IX

In this work, polyclonal antibodies anti-human Factor IX were produced in New Zealand rabbits by immunization with commercial pure human FIX (hFIX) (Octanyne®, Octapharma, USA). The serum containing immunoglobulins anti-hFIX was useful to detect hFIX antigen in human plasma fractions submitted to anionic exchange chromatographic process and with a large yield. Immunoassays (ELISA) using bovine serum albumin, trypsin and peptides generated by cleavage assays with trypsin as digestion enzyme was performed and revealed adequate specificity of the polyclonal antibodies produced.

Neste trabalho foram produzidos anticorpos policlonais anti-fator IX humano em coelhos New Zealand imunizados com FIX humano (hFIX) comercial puro (Octanyne®, Octapharma, EUA). O soro contendo as imunoglobulinas anti-hFIX foi útil para a detecção do antígeno hFIX em frações do plasma humano submetido a cromatografia de troca iônica. Imunoensaios (ELISA) usando soro-albumina bovina, tripsina e peptídeos gerados por ensaios de clivagem com tripsina com enzima de digestão foram realizados e revelaram especificidade adequada dos anticorpos policlonais produzidos.

Os vírus linfotrópicos de células T humanos (HTLV) na última década (1990-2000): aspectos epidemiológicos / Human T-cell lymphotropic viruses (HTLV) in the last decade (1990-2000): epidemiological aspects

Vinte anos após o isolamento do vírus linfotrópico humano tipo 1, muitos aspectos epidemiológicos, patogênicos e filogenéticos já estäo esclarecidos. Sabe-se que em regiöes endêmicas a prevalência aumenta com a idade e é maior no sexo feminino. Três patologias estäo claramente relacionadas a ele: paraparesia espástica tropical/ mielopatia associada ao HTLV, leucemia de células T do adulto e uveíte. Os modos de infecçäo, semelhantes aos dos outros retrovírus, säo: transfusäo de sangue, relaçöes sexuais näo protegidas, transplacentária e durante o aleitamento materno. A história natural das doenças relacionadas ao HTLV-I ainda näo está bem estabelecida. O risco de portadores da infecçäo desenvolverem patologias depende de mais estudos de incidência para serem corretamente estimados. Menos se conhece sobre o HTLV-II. A despeito do alto grau de homologia entre os dois tipos, os vírus interagem de forma bem diversa com os infectados, näo havendo uma associaçäo clara de doença com o HTLV-II. Relatos recentes têm apontado sua participaçäo em casos de mielopatia crônica semelhante à TSP/HAM. As implicaçöes incertas do prognóstico para pessoas infectadas pelo vírus linfotrópico humano (HTLV-I/II) e suas formas de transmissäo constituem um problema de saúde pública, principalmente em áreas consideradas endêmicas para esse vírus